实验一:观察DNA和RNA在细胞中的分布
1.实验原理:利用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布;甲基绿和吡罗红对DNA和RNA的亲和力不同:甲基绿+DNA→绿色
吡罗红+RNA→红色
2.分布:真核生物DNA主要分布在细胞核中;
线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA;RNA主要分布在细胞质中。
3.实验结果:细胞核呈绿色,细胞质呈红色.
4.实验结论:DNA主要分布在细胞核中;RNA主要分布在细胞质中;
5.实验流程:
(1)取口腔上皮细胞制片:①载玻片上滴一滴质量分数为:0.9%NaCl溶液;
②漱口后,用消毒牙签刮口腔内壁后放在载玻片的液滴中涂抹几下;③载玻片在酒精灯上烘干,盖上;
(2)水解:①载玻片放入盛有30ml质量分数为8%的HCl的小烧杯中;②大烧杯中加入30℃温水;
③将小烧杯放入大烧杯中保温5min;
(3)冲洗涂片:用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s;
(4)染色:①吸水纸吸去载玻片的水分;②滴两滴混合染液,染色5min;③吸去多余的染液,盖上盖玻片;
(5)观察:先低倍后高倍;
6、几种液体在实验中的作用:
(1)0.9%NaCl溶液:保持口腔上皮的正常形态。
8%的HCl:①改变细胞膜等的通透性;②使染色质中的DNA与蛋白质分开。蒸馏水:配置染液;冲洗载玻片。
(2)混合染液需要现配现用;
(3)该实验不宜用深色的材料,避免颜色对实验的干扰。
实验二:物质鉴定
一、实验原理:还原糖+斐林试剂~砖红色沉淀(水浴加热)
脂肪+苏丹III~橘黄色(滴液观察或制片显微镜观察)
脂肪+苏丹IV~红色
蛋白质+双缩脲试剂~紫色反应(不加热)
1、还原糖的检测
(1)材料的选取:还原糖含量高,白色或近于白色,如:苹果,梨,白萝卜。
(2)试剂:斐林试剂(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),现配现用。
(3)步骤:取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL(斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入)→水浴
加热2min左右→观察颜色变化(白色→浅蓝色→砖红色)
实验三:观察叶绿体和细胞质流动
1、材料:新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶,口腔上皮细胞临时装片
2、原理:叶绿体在显微镜下观察,绿色,球形或椭球形。
用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。
知识概要:取材、制片、低倍观察、高倍观察
实验四:观察有丝分裂
1、材料:洋葱根尖(葱,蒜)
2、步骤:(一)洋葱根尖的培养
(二)装片的制作
3、实验原理:
(1)龙胆紫溶液能将染色体染成深色
(2)有丝分裂各个时期细胞内染色体的形态和行为变化不同,可用高倍显微镜根据各个时期内染色体的变化情况,识别该细胞处于那个时期。
制作流程:解离→漂洗→染色→制片
1.解离:药液:质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精(1:1混合液).时间:3~5min.目的:使组织中的细胞相互分离开来.
2.漂洗:用清水漂洗约10min.目的:洗去药液,防止解离过度,并有利于染色.
3.染色:用质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液(或醋酸洋红液)染色3~5min
目的:使染色体着色,利于观察.
4.制片:将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片.然后用拇指轻轻地按压载玻片.
目的:使细胞分散开来,有利于观察.
(三)观察
1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂。(长方形:伸长区)
2、换高倍镜下观察:分裂中期→分裂前、后、末期→分裂间期。(注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点)。其中,处于分裂间期的细胞数目最多。
实验五:色素的提取和分离
1、原理:(1)叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇——提取色素(2)各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同——分离色素
2、步骤:
提取色素
(1)称取5g绿色叶片并剪碎提取色素
(2)加入少量SiO2、CaCO3和5ml丙酮
(研钵→研磨→漏斗过滤→,收集到试管内并塞紧管口)
制滤纸条
(1)将干燥的滤纸剪成6cm长,1cm宽的纸条,剪去一端两角(使层析液同时到达滤液细线)
(2)在距剪角一端1cm处用铅笔画线
滤液划线
(1)用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线
(2)干燥后重复划2-3次
纸上层析
(1)向烧杯中倒入3ml层析液(以层析液不没及滤液细线为准)
(2)将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁,轻轻插入层析液中
(3)用培养皿盖盖上烧杯
观察结果:滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带。